发言人：汪寅
主 题：线粒体肌病酶组织化学敏感性的探讨
（图1 汪寅论文交流）
（图2 汪寅论文交流PPT）
线粒体肌病酶组织化学敏感性的探讨
汪寅 王俊 林洁 朱文华 卢家宏
复旦大学附属华山医院神经病理室，神经内科肌病专业组；复旦大学附属华山医院神经内科肌病专业组
目的：线粒体肌病是由线粒体呼吸链氧化代谢障碍所引起的一组累及骨骼肌或神经系统的遗传性疾病。按线粒体基因或核编码线粒体呼吸链基因变异方式和临床表型，一般可分为慢性进行性眼外肌麻痹(CPEO)、Kearns-Sayre综合征(KSS)、肌阵挛性癫痫伴破碎红纤维综合征(MERRF)、线粒体脑肌病伴高乳酸血症和卒中样发作(MELAS)、Leber遗传性视神经病和亚急性坏死性脑脊髓病(Leigh's disease)等。破碎红纤维的出现一般认为是线粒体疾病肌肉病理的共同特征，为了解线粒体疾病的肌纤维对酶组织化学染色的敏感性，我们对CPEO、MELAS和KSS病例肌肉的酶组织化学活性、抗线粒体抗体的免疫活性和超微结构进行了观察，报道如下。
方法：自2006年1月至2007年5月经临床拟诊为CPEO、MMELAS和KSS的病例分别为4例、8例和1例，合计为13例。其中；男性11例、女性2例，年龄自11岁至71岁、平均年龄为24岁。所有病例均行肱二头肌或股四头肌活检，新鲜组织连续冰冻切片6µ厚，经乙醇固定后行HE常规染色及Gomori、SDH、NADH、COX、PAS、Oil red、ATPase 9．6和4．6酶组织化学染色；采用美国长岛抗体公司的抗线粒体抗体行免疫组织化学染色；所有活检肌肉，留取少量组织，经戊二醛固定后，制作电镜标本进行观察，部分病例制作半薄切片定位后，超薄切做重点观察。
结果：HE常规染色显示I、II型肌纤维形态不均等，有核内移现象。在MELAS的病例中，可见不同程度的肌纤维变性、坏死和再生现象。破碎红纤维对酶组织化学染色的敏感性存在差异，并且在不同的临床类型之间也存在一定的差异。Gomori染色对破碎红纤维的检出率，在．MEILAS的病例中约占75％(8例中6例为阳性)、在CPEO的病例中约占25％(4例中1例为阳性)、KSS病例为阴性。在13例病例中有12例，SDH染色染色均发现肌纤维或间质内血管壁有不同程度的深染现象，检出率为92％。全例COX染色均发现肌纤维有不同程度的活性丧失或深染现象，检出率为100％。NADH染色的检出率仅为23％(13例中3例为阳性，MELAS2例、CPEO1例)。抗线粒体抗体的免疫组织化学染色对Gomori阳性的破碎红纤维具有很好的定位功能，免疫反应呈强阳性表达，并且在电镜下可见线粒体数量增多和异常聚集，这种现象在MELAS病例中比较常见。
结论：Gomori阳性的破碎红纤维只能反映线粒体在数量和分布上的情况，这种变化在MELAS病例中常见。但是，COX和SDH染色更能及早反映线粒体呼吸链，在氧化代谢过程中，电子传递物质酶变化的实际情况，对线粒体疾病的肌肉病理观察更具敏感性。
